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                使用先進的熒光顯微鏡技術提高分辨率

                來源:本站       閱讀量:14     時間:2022-06-24 14:59:07

                許多先進的熒光顯微鏡技術屬于超分辨率顯微鏡 (SRM) 的范疇,與傳統方法相比,它們可以實現更高的橫向 (x, y) 分辨率。在 SRM 類別中,方法大致分為降低點擴散函數維數的方法(由于光衍射從每個熒光團發出的模糊大?。┖突谕ㄟ^空間或時間切換熒光團順序可視化熒光團的方法。明暗狀態。大多數 SRM 技術需要使用可光切換的熒光團。

                受激發射耗盡顯微鏡 (STED) 是一種 SRM 技術,它通過關閉定義區域邊緣的任何熒光團來降低點擴散函數。它通過將激發激光與第二個(更長波長)激光重疊以形成甜甜圈的形狀來實現這一點,從而將外圍熒光團的發射刺激到飽和/失活點。通過確保僅從甜甜圈中間的那些熒光團檢測到熒光,STED 提供了僅 20 nm 的分辨率。

                光激活定位顯微鏡 (PALM) 和隨機光學重建顯微鏡 (STORM) 涉及以循環方式激活不同的熒光團子集。簡而言之,弱的短波長激光激活一些熒光團,而較長波長的激光激發它們,從而收集發射。兩種技術之間的主要區別在于,PALM 通常依賴于融合到感興趣的目標(例如 PA-GFP、PA-mCherry1、PA-TagRFP)的常用熒光蛋白的可光激活 (PA) 版本的表達,而 STORM 使用可光活化的有機染料。此外,雖然 PALM 熒光團在激活、激發和定位后會被光漂白(允許對另一組熒光團進行成像),STORM 熒光團可以通過位于附近的活化劑染料重新活化,將來自數千個循環的定位結合起來用于圖像構建。與傳統熒光顯微鏡相比,PALM 和 STORM 技術分別將分辨率提高了 10 倍和 20 倍。


                寬場熒光顯微鏡共聚焦顯微鏡STED棕櫚STED
                衍射極限?是的是的
                成像模式寬場掃描掃描寬場寬場
                方法全樣本成像定義區域的成像使用兩個不同的波長在定義區域邊緣的熒光團受激發射耗盡空間上不同熒光團的隨機激活,然后是激發、定位和光漂白空間上不同的可切換熒光團的隨機激活,然后進行定位
                空間/時間分辨率200 納米512 像素 × 512 像素時為 200 nm / 5 ms20 nm,3.8 mW / 1 ms,10 μm 215 μm 20 nm / 1 分鐘21500 μm 9 nm / 25 分鐘2

                創誠致佳公司主營產品有:硬度計、金相切割機、金相顯微鏡、金相鑲嵌機、金相磨拋機、硫化儀、門尼粘度計、光學顯微鏡、環境試驗箱、拉力試驗機、量具、測量機、進口打標機、紅外熱像儀、表面光學檢測儀、測厚儀、粗糙度儀等。我們的產品可廣泛應用于各領域的質量控制、科學研究、產品檢驗、安全、和環境。如需采購進口硬度計、橡膠硬度計、金相顯微鏡、金相鑲嵌機、金相切割機、金相磨拋機等產品,歡迎聯系創誠致佳咨詢價格.

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